一、常規(guī)清洗(日常維護(hù))
1. 流動(dòng)相選擇
- 高水相沖洗：優(yōu)先使用含0.1%甲酸的水溶液，低比例有機(jī)相有助于溶解極性強(qiáng)的氨基酸殘留。
- 流速控制：以0.2-0.3mL/min低速?zèng)_洗，避免高壓損傷填料，逐步升至0.5-0.8mL/min。
2. 沖洗體積計(jì)算
- 按柱體積倍數(shù)沖洗。對(duì)于4.6×150mm色譜柱，需至少?zèng)_洗20倍柱體積。
二、深度清潔(針對(duì)性去除頑固污染物)
1. 有機(jī)溶劑梯度法
- 甲醇/水體系：依次用5%、20%、50%、100%甲醇梯度沖洗，每階段保持10-15分鐘。
- 乙腈/異丙醇組合：對(duì)脂溶性污染物，采用乙腈-異丙醇(1:1)混合液沖洗，可有效清除蛋白質(zhì)碎片。
2. 酸堿交替處理
- 酸性清洗：0.1mol/L磷酸溶液，適用于溶解金屬離子螯合物。
- 堿性清洗：氨水，可分解生物大分子。
3. 特殊污染物處理
- 硫醇類物質(zhì)：添加β-巰基乙醇，可還原二硫鍵。
三、維護(hù)與儲(chǔ)存規(guī)范
1. 保存溶劑選擇
- 短期存放可用80%甲醇，長期存儲(chǔ)推薦含0.1%疊氮化鈉的乙腈-水。
2. 再生程序
- 每月執(zhí)行一次完整再生流程，提高流速至2.0mL/min并維持30分鐘。
3. 環(huán)境控制
- 儲(chǔ)存溫度保持在4-25℃，濕度低于60%，避免陽光直射。
四、驗(yàn)證與問題排查
1. 性能驗(yàn)證指標(biāo)
- 基線波動(dòng)<0.5mAU，理論塔板數(shù)恢復(fù)至初始值90%以上。
2. 異常情況處理
- 壓力驟升：立即停泵，反向低壓沖洗篩板。
- 保留時(shí)間漂移：重新校準(zhǔn)流動(dòng)相pH，檢查緩沖液新鮮度。
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